1．低水質(zhì)的水是怎樣影響電泳實(shí)驗(yàn)的？
　　
　　在電泳實(shí)驗(yàn)中，水用來配制用以進(jìn)行樣品分離的凝膠體。由于RNA酶能夠破壞待分離的RNA，所以，用來制備凝膠的水當(dāng)中無RNA酶污染是**關(guān)鍵的。另外，水還用來配制緩沖液。
　　
　　2．我使用注射用水(WFI)(小于500ppb)來做HPLC分析。我對(duì)結(jié)果很滿意，我為什么要用低TOC含量的水？
　　
　　推薦的HPLC級(jí)水是低有機(jī)和無機(jī)污染物的水。流動(dòng)相中的雜質(zhì)，尤其是用于HPLC分析的純水中的雜質(zhì)可能會(huì)導(dǎo)致幾個(gè)問題。在梯度運(yùn)行中污染物會(huì)產(chǎn)生峰。這會(huì)導(dǎo)致峰的鑒定和量化困難。同時(shí)水中的污染物還能損壞柱子。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)溶液用含有雜質(zhì)的超純水配制時(shí)，樣品的鑒定和量化時(shí)就會(huì)不**。
　　
　　大量的研究顯示了水質(zhì)在HPLC分析中的重要性，要獲得高質(zhì)量的基線，高純水的儲(chǔ)存是不恰當(dāng)?shù)?。越來越多靈敏的測(cè)試方法與水質(zhì)緊密相連。
　　
　　3．DEPC處理水是分子生物學(xué)應(yīng)用中更好的選擇？
　　
　　不是??！
　　
　　RNA酶的活性能通過酶變性來抑制，方法有高壓**；用DEPC使酶失活；通過超濾去除酶。
　　
　　DEPC是一種抑制溶液中RNA酶活性的常用方法。當(dāng)酶用DEPC處理后，組氨酸12用來與DEPC反應(yīng)使之不能再與RNA發(fā)生反應(yīng)。酶長(zhǎng)久失活，但是并未從溶液中除掉。
　　
　　DEPC水也許沒有RNA；但是其它污染物如離子和TOC含量高。眾所周知有機(jī)物能夠影響生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。另外，DEPC還可能致癌。
　　
　　4．Milli-QBiocel產(chǎn)水水質(zhì)和DEPC水一樣好嗎？
　　
　　RNA酶的活性可通過酶變性來抑制，通過高壓**，基于抑制劑如DEPC處理的酶失活，通過超濾直接除去酶。
　　
　　DEPC是一種常見的抑制溶液中RNA酶的方法。當(dāng)酶用DEPC處理后，組氨酸12與DEPC反應(yīng)使之不能再與RNA發(fā)生反應(yīng)。酶長(zhǎng)久失活，但是并未從溶液中除掉。
　　
　　超濾是**能從溶液中除掉RNA酶的方法。Mill-QBiocel用內(nèi)置于ABS(acrylonitrilebutadienestyrenepolymer)中的聚砜超濾膜來除去酶，ABS幾乎不會(huì)向溶液中釋放離子和有機(jī)物，因此不會(huì)影響水質(zhì)。在流速500mL/min下以兩個(gè)不同濃度(0.1ng/L,1ng/L)的RNA酶進(jìn)行膜挑戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，所用的分子量為13000道爾頓的超濾柱能完全截留200L的濃度為0.1ng/LRNA酶A，在1ng/L濃度時(shí)，在處理100L后，能夠檢測(cè)到顯著的RNA酶A。
　　
　　5．**對(duì)HPLC相關(guān)應(yīng)用有什么影響？
　　
　　用含有**的水制備HPLC系統(tǒng)的流動(dòng)相，會(huì)產(chǎn)生很多問題：
　　
　　被色譜介質(zhì)(指色譜柱——譯注)截留下來的**會(huì)增殖，造成阻塞。
　　
　　**會(huì)附著在色譜微球表面，覆蓋住活性位點(diǎn)。
　　
　　會(huì)造成洗脫時(shí)間發(fā)生變動(dòng)。
　　
　　截流下來的**代謝產(chǎn)生的有毒副產(chǎn)品會(huì)在分析過程中產(chǎn)生假峰，帶來錯(cuò)誤的分析結(jié)果。
　　
　　6．什么是***干擾物？它會(huì)如何干擾分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)應(yīng)用？應(yīng)如何去除？
　　
　　***干擾物是一種合成的化學(xué)試劑，當(dāng)被注入生命機(jī)體的時(shí)候，它們會(huì)模擬或者阻斷***的作用，干擾機(jī)體的正常生物功能。通過改變***水平、阻止或者促進(jìn)***的分泌或者改變***在機(jī)體內(nèi)部傳遞的途徑，從而影響和干擾這些***所控制的生物功能。以人類***干擾物而知名的化學(xué)試劑包括：二乙基乙烯雌酚(雌二醇)、二氧(雜)芑、PCBs、DDT和其他殺蟲劑。
　　
　　如今，很多科學(xué)家都在研究***干擾物對(duì)人類和其他動(dòng)物早期發(fā)育可能發(fā)生的影響。比如正在進(jìn)行的關(guān)于殺蟲劑(二氧芑、DDT、阿特拉津等等)對(duì)***系統(tǒng)損傷的研究。在這類研究應(yīng)用中，所有的實(shí)驗(yàn)用品中不含***干擾品至關(guān)重要。
　　
　　雙酚A是用來合成環(huán)氧樹脂和聚碳酸酯塑料的單體，在不完全聚合或者塑料老化的時(shí)候會(huì)溶出，能夠模擬雌**功能。
　　
　　酞酸酯是一大類增塑劑分子的通稱，通過調(diào)整添加量可以改變材料的硬度，也是一種***干擾物。
　　
　　實(shí)驗(yàn)室中使用的水純化系統(tǒng)也有可能通過以下三種方式釋放雙酚A或者酞酸酯，從而成為***干擾物的污染源：原水中含有這些有機(jī)物；純水系統(tǒng)生產(chǎn)材料溶出；以及純化介質(zhì)溶出。*早的Millipak是由聚碳酸酯制造的，會(huì)有雙酚A和酞酸酯這樣的***干擾物溶出，新型的MillipakExpress則是由SAN材料制備，***干擾物溶出量大大降低。
　　
　　7．重金屬對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有什么影響？
　　
　　答：很多實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證明了重金屬和聚合芳烴(PAH)的細(xì)胞**影響
　　
　　存在于空氣，水和土壤中的環(huán)境化學(xué)污染物在很多方面影響著人類。汽車廢氣的燃燒所才產(chǎn)生的PAHs，和香煙影響***系統(tǒng)。很多重金屬會(huì)導(dǎo)致腎衰竭，而汞能移動(dòng)到大腦導(dǎo)致神經(jīng)衰弱。
　　
　　在測(cè)試的12種重金屬(Al，Ge，Ca，Cu，Pb，Mg，Mn，鎳，錫，Zn，硒酸鹽和亞硒酸鹽)中有四種(Ca，Cu,鎳和Zn)顯示了細(xì)胞毒性。即使只有1.5M的重金屬(Cd,Cu,Ni和Zn)，也能發(fā)現(xiàn)有細(xì)胞死亡。因此，推薦使用無離子污染和無有機(jī)污染的水來做細(xì)胞培養(yǎng)。