摘要：橙皮苷為維生素P類藥，用于增強(qiáng)****的韌性。橙皮甙的衍生物甲基橙皮甙，也是維生素P類藥，是日本《食品添加物公定書》中收載的品種。是**高血壓和心肌梗塞的**，醫(yī)藥工業(yè)中用作制藥的原料，是中成藥脈通的主要組成之一。

      目的建立術(shù)后飲中橙皮苷含量的測定方法。方法采用高效液相色譜法，色譜柱為CenturySILC18-AQ（250mm×4.6mm，5μm），流動相為乙腈-0.2%磷酸溶液（21∶79），流速為0.8mL/min，檢測波長為284nm，柱溫為室溫，進(jìn)樣量為20μL。結(jié)果橙皮苷濃度在1.004～10.04μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率為98.59%，RSD＝0.72%。結(jié)論方法簡便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可作為術(shù)后飲中橙皮苷的含量測定方法。

      「關(guān)鍵詞」高效液相色譜法；術(shù)后飲；橙皮苷；含量測定Keywords：HPLC；Shuhouyin；hesperidin；contentdetermination術(shù)后飲系甘肅武威腫瘤醫(yī)院研制的醫(yī)院制劑，是由**參、白花蛇舌草、陳皮、甘草等藥味制成的合劑，具有補(bǔ)氣**、**寬中、降逆下氣的功能，用于手術(shù)后氣血虧虛所致的腑氣不通諸癥的**。經(jīng)過臨床多年使用，療效顯著。為控制其質(zhì)量，參考文獻(xiàn)[1-6]，采用高效液相色譜（HPLC）法對方中君藥陳皮的主要有效成分橙皮苷進(jìn)行了含量測定，結(jié)果方法簡便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，為術(shù)后飲質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究與指標(biāo)的制定提供了試驗(yàn)依據(jù)。

      1儀器與試藥SSIPC-2000型高效液相色譜儀，Model500紫外檢測器，7725i手動進(jìn)樣閥，分析之星色譜工作站；XT120A電子分析天平（瑞士普利賽斯）；HS10260D超聲波清洗器（天津市恒奧科技發(fā)展有限公司）。

      橙皮苷對照品（中國藥品生物制品檢定所提供，批號110721-200512，供含量測定用）；術(shù)后飲樣品及缺陳皮的陰性對照樣品均由甘肅武威腫瘤醫(yī)院提供（批號060810，060812，060815）。水為重蒸餾水，乙腈為色譜純，聚酰胺為層析用試劑（80～100目），其余試劑均為分析純。

      2方法與結(jié)果2.1色譜條件色譜柱：CenturySILC18-AQ（250mm×4.6mm，5μm，大連江申分離科學(xué)技術(shù)公司）；流動相：乙腈-0.2%磷酸溶液（21∶79）；流速：0.8mL/min；檢測波長：284nm；柱溫：室溫；進(jìn)樣量：20μL。在上述色譜條件下，橙皮苷與相鄰峰達(dá)到基線分離，且陰性對照無干擾，峰形對稱，分離效果良好。色譜圖見圖1。

      2.2對照品溶液的制備精密稱取橙皮苷對照品25.1mg，置25mL量瓶中，加甲醇適量，超聲助溶，然后用甲醇溶解至刻度，搖勻，配成濃度為1.004mg/mL的甲醇溶液，精密吸取2mL置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

      2.3供試品溶液的制備精密量取本品10mL，置具塞錐形瓶中，加硅藻土5g，攪拌均勻，烘干，精密加入甲醇120mL，稱定重量，充分?jǐn)嚢?，超?0min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液100mL置蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，殘?jiān)?0%乙醇100mL使溶解并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加石油醚（60～90℃）萃取3次（50、30、20mL），棄去石油醚液，分取70%乙醇液置蒸發(fā)皿中，蒸去乙醇，剩余水液上聚酰胺層析柱（1cm×25cm層析柱，稱聚酰胺1.8g，濕法裝柱），先用20mL水沖洗（6mL/min），再加入70mL甲醇沖洗，收集甲醇液水浴蒸干，殘?jiān)眉状既芙獠⒍ㄈ葜?0mL容量瓶中，用0.45μm微孔濾膜過濾后備用。

      2.4線性關(guān)系考察精密吸取上述橙皮苷濃度為1.004mg/mL的甲醇溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL，分別置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，在上述色譜條件下分別進(jìn)樣20μL，測定。以峰面積對濃度進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為：A＝27248838.6C＋91201.7，r＝0.9997。表明橙皮苷濃度在1.004～10.04μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

      2.5精密度試驗(yàn)精密吸取對照品溶液20μL，重復(fù)進(jìn)樣5次，計(jì)算5次峰面積的RSD＝0.83%。

      2.6穩(wěn)定性試驗(yàn)取室溫放置的對照品溶液，在上述色譜條件下，于0、1、2、4、8、24h分別進(jìn)樣20μL，測定峰面積的RSD＝0.71%，表明橙皮苷甲醇溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

      2.7重復(fù)性試驗(yàn)精密量取供試品（批號060812）10mL各5份，按“樣品測定”項(xiàng)下操作，計(jì)算含量，結(jié)果分別為0.2161、0.2149、0.2181、0.2185、0.2171㎎/mL，平均含量為0.2169mg/mL，RSD＝0.94%。